تخصيص انترلوكين 1 ألفا الجرذ إليسا كيت قبل - المغلفة مع ضد ILA 1A الأجسام المضادة

96 آبار عالية الحساسية إليسا كيت للجرذان انترلوكين 1 ألفا

Cat.No E0118 Ra

نطاق المنحنى القياسي : 1ng / l - 300ng / l

حساسية : 0.48ng / لتر

الحجم : 96 بئرا

التخزين : تخزين الكواشف في 2-8 درجة مئوية. لأكثر من 6 أشهر تخزين الرجوع إلى تاريخ انتهاء الصلاحية يبقيه عند -20 درجة مئوية. تجنب تكرار دورات ذوبان الجليد. إذا تم فتح الكواشف الفردية فمن المستحسن أن يتم استخدام هذه المجموعة في غضون شهر واحد.

* هذا المنتج مخصص للاستخدام في الأبحاث فقط ، وليس للاستخدام في إجراءات التشخيص. يوصى بشدة بقراءة هذه التعليمات بالكامل قبل الاستخدام.

أنا عشت يو سي

مجموعة الساندويتش هذه هي للكشف الكمي الدقيق للجرم انترلوكين 1 Alpha (المعروف أيضا باسم IL-1A) في المصل ، والبلازما ، وزرع الخلايا الخلوية ، lysates الخلية ، homogenates الأنسجة.

A ssay P rictle

هذه المجموعة هي مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (إليسا). وقد تم طليحة الصفيحة مسبقا بأضداد الجرذ IL-1A. يضاف IL-1A الموجود في العينة ويربط للأجسام المضادة المغلفة على الآبار. ثم يضاف الفأر البيروكسيديز IL-1A الجسم المضاد ويربط IL-1A في العينة. ثم تتم إضافة Streptavidin-HRP ويربط الجسم المضاد IL-1A Biotinylated. بعد الحضانة غير منضبطة يتم غسل Streptavidin-HRP بعيدا خلال خطوة الغسيل. ثم يتم إضافة حل الركيزة ويتطور اللون بما يتناسب مع كمية الجرذ IL-1A. يتم إنهاء التفاعل بإضافة محلول توقف حمضي ويتم قياس الامتصاص عند 450 نانومتر.

احتياطات P

• قبل الاستخدام ، يجب تدفئة الطقم والعينة بشكل طبيعي إلى درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة.
• يجب اتباع هذه التعليمات بدقة في التجربة.
• بمجرد إزالة العدد المطلوب من الشرائط ، قم بإعادة ختم الكيس على الفور لحماية المتبقي من التدهور. تغطية جميع الكواشف عندما لا تكون قيد الاستعمال.
• تأكد من ترتيب pipetting ومعدل إضافة من جيدا إلى عندما الكواشف pipetting.
• يجب أن تكون نصائح الماصة ولحام السدادة في اليد نظيفة ويمكن التخلص منها لتجنب التلوث المتبادل.
• تجنب استخدام الكواشف من مجموعات مختلفة معا.
• حل Substate B حساس للضوء ، لا تعرض محلول الطبقة السفلية B للضوء لفترة طويلة.
• وقف الحل يحتوي على حمض. يرجى ارتداء حماية العين واليد والبشرة عند استخدام هذه المواد. تجنب ملامسة الجلد أو الأغشية المخاطية بعدة كاشف.
• لا ينبغي استخدام الطقم بعد تاريخ انتهاء الصلاحية.

Wash Buffer Dilute 20ml من Wash Wash Buffer Concentrate 30x في الماء منزوع الأيونات أو المقطر للحصول على 500 مل من 1x Wash Wash. إذا تشكلت البلورات في المركز ، فاخلطها بلطف حتى تذوب البلورات تمامًا.

A ssay P rocedure

1. إعداد جميع الكواشف ، والحلول القياسية والعينات حسب التعليمات. تقديم جميع الكواشف إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام. يتم إجراء الفحص في درجة حرارة الغرفة.

2. تحديد عدد الشرائط المطلوبة للمقايسة. أدخل الشرائط في الإطارات للاستخدام. يجب تخزين الشرائط غير المستخدمة في 2-8 درجة مئوية.

3. إضافة معيار 50μl إلى معيار جيد. ملاحظة : لا تضيف أي جسم مضاد إلى البئر القياسي لأن المحلول القياسي يحتوي على جسم مضاد حيوي.

4. إضافة عينة 40μl إلى عينة الآبار ثم إضافة 10μl الأجسام المضادة IL-1A إلى عينة الآبار ، ثم إضافة 50μl streptavidin-HRP إلى عينات الآبار والآبار القياسية (ليس بآلية التحكم الفارغة). اخلط جيدا. تغطية لوحة مع السداده. احتضان 60 دقيقة عند 37 درجة مئوية.

.5 ﻗﻢ ﺑﺈزاﻟﺔ اﻟﺴﺪادة واﻏﺴﻞ اﻟﺼﻔﻴﺤﺔ 5 ﻣﺮات ﺑﻤﺤﻄﺔ اﻟﻐﺴﻞ. نقع الآبار مع ما لا يقل عن 0.35 مل عازلة غسل لمدة 30 ثانية إلى 1 دقيقة لكل غسل. لغسيل أوتوماتيكي ، ينضح جميع الآبار ويغسل 5 مرات بمحلول غسيل ، والآبار الزائدة مع عازلة الغسيل. صفي الصفيحة على مناشف ورقية أو مواد ماصة أخرى.

6. أضف 50μl من محلول الركازة A إلى كل بئر ثم أضف 50μl من محلول الركازة B إلى كل بئر. احتضان لوحة مغطاة بسداد جديد لمدة 10 دقائق عند 37 درجة مئوية في الظلام.

7. أضف 50μl Stop Solution إلى كل بئر ، سيتغير اللون الأزرق إلى الأصفر على الفور.

8. حدد الكثافة الضوئية (قيمة التطوير التنظيمي) لكل بئر على الفور باستخدام القارئ الصغري المحدد على 450 نانومتر خلال 10 دقائق بعد إضافة حل التوقف.

المراجع

Westphal E.، Li Chen، Pilowski C.، Koch S.، Ebelt H.، Muller-Werdan U.، Werdan K.، Loppnow H.
J. Endotoxin Res. 13: 25-34 (2007)