المهنية Ps Human Elisa Kit تخصيص الكشف الكمي الدقيق

عالية الدقة والحساسية الإنسان PS ELISA كيت 96 ويلز 48 ويلز حسب الطلب

Cat.No E 0201 Hu

نطاق منحنى قياسي : 0.5ng / ml - 200ng / ml

حساسية : 0.22ng / ml

* هذا المنتج مخصص للاستخدام في الأبحاث فقط ، وليس للاستخدام في إجراءات التشخيص. يوصى بشدة بقراءة هذه التعليمات بالكامل قبل الاستخدام.

P ريسيجين

الدقة داخل الفحص (الدقة داخل اختبار) تم اختبار ثلاث عينات من التركيز المعروف على لوحة واحدة لتقييم الدقة داخل الفحص.

الدقة بين المقايسة (الدقة بين المقايسات) تم اختبار ثلاث عينات من التركيز المعروف في اختبارات منفصلة لتقييم الدقة بين المقايسة.

CV (٪) = SD / mean x 100

Intra-Assay: CV <8٪

بين المقايسة: السيرة الذاتية <10 ٪

أنا عشت يو سي

مجموعة الساندويتش هذه هي للكشف الكمي الدقيق عن الصفيحات البشرية المحددة (والمعروفة أيضًا بـ PS) في المصل ، والبلازما ، والنباتات الخلوية للخلايا ، و lysates الخلية ، و homogenates الأنسجة.

M aterial R equired B ut N ot supplied

• 37 درجة مئوية ± 0.5 درجة مئوية حاضنة
• ورقة ماصة
• ماصات الدقة ونصائح ماصة المتاح
• أنابيب نظيفة
• ماء منزوع الأيونات أو الماء المقطر
• قارئ microplate مع 450 ± 10nm الطول الموجي مرشح

جمع العينات

مصل المصل يسمح بالتجلط لمدة 10-20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. الطرد المركزي في 2000-3000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة.

البلازما جمع البلازما باستخدام EDTA أو الهيبارين كمضاد للتخثر. عينات الطرد المركزي لمدة 15 دقيقة في 2000-3000 دورة في الدقيقة في 2 - 8 درجة مئوية في غضون 30 دقيقة من جمع.

البول جمع بواسطة أنبوب معقمة. الطرد المركزي في 2000-3000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة تقريبا. عند جمع السائل pleuroperitoneal والسائل الدماغي الشوكي ، يرجى اتباع الإجراءات المذكورة أعلاه.

الخلية C ulture S upernatant تجمع بواسطة أنابيب معقمة عند فحص مكونات سرية. الطرد المركزي في 2000-3000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة تقريبا. جمع supernatants بعناية. عند فحص المكونات داخل الخلية ، استخدم PBS (الرقم الهيدروجيني 7.2-7.4) لتخفيف تعليق الخلية لتركيز الخلية ما يقرب من 1 مليون / مل. تلف الخلايا من خلال دورات التجميد والذوبان المتكررة للسماح للمكونات الداخلية. الطرد المركزي في 2000-3000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة تقريبا.

الأنسجة شطف الأنسجة في PBS (الرقم الهيدروجيني 7.4) لإزالة الدم الزائد بدقة ويزن قبل التجانس. أنسجة اللحم المفروم وتجانسها في PBS (pH7.4) مع الخالط الزجاج على الجليد. ذوبان الجليد في درجة حرارة 2-8 درجة مئوية أو تجمد عند -20 درجة مئوية. الطرد المركزي في 2000-3000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة تقريبا.

* لا يمكن تخفيف S وافرة مع هذه المجموعة. بسبب المادة التي نستخدمها لإعداد الطقم ، قد يؤدي تداخل عينة المادة إلى زيف خصوصية ودقة الفحص.

A ssay P rocedure

1. إعداد جميع الكواشف ، والحلول القياسية والعينات حسب التعليمات. تقديم جميع الكواشف إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام. يتم إجراء الفحص في درجة حرارة الغرفة.

2. تحديد عدد الشرائط المطلوبة للمقايسة. أدخل الشرائط في الإطارات للاستخدام. يجب تخزين الشرائط غير المستخدمة في 2-8 درجة مئوية.

3. إضافة معيار 50μl إلى معيار جيد. ملاحظة : لا تضيف أي جسم مضاد إلى البئر القياسي لأن المحلول القياسي يحتوي على جسم مضاد حيوي.

4. إضافة عينة 40μl إلى عينة الآبار ثم إضافة 10μl ضد الأجسام المضادة PS لآلة عينة ، ثم إضافة 50μl streptavidin-HRP إلى عينات الآبار والآبار القياسية (ليس بآلية التحكم الفارغة). اخلط جيدا. تغطية لوحة مع السداده. احتضان 60 دقيقة عند 37 درجة مئوية.

.5 ﻗﻢ ﺑﺈزاﻟﺔ اﻟﺴﺪادة واﻏﺴﻞ اﻟﺼﻔﻴﺤﺔ 5 ﻣﺮات ﺑﻤﺤﻄﺔ اﻟﻐﺴﻞ. نقع الآبار مع ما لا يقل عن 0.35 مل عازلة غسل لمدة 30 ثانية إلى 1 دقيقة لكل غسل. لغسيل أوتوماتيكي ، ينضح جميع الآبار ويغسل 5 مرات بمحلول غسيل ، والآبار الزائدة مع عازلة الغسيل. صفي الصفيحة على مناشف ورقية أو مواد ماصة أخرى.

6. أضف 50μl من محلول الركازة A إلى كل بئر ثم أضف 50μl من محلول الركازة B إلى كل بئر. احتضان لوحة مغطاة بسداد جديد لمدة 10 دقائق عند 37 درجة مئوية في الظلام.

7. أضف 50μl Stop Solution إلى كل بئر ، سيتغير اللون الأزرق إلى الأصفر على الفور.

8. حدد الكثافة الضوئية (قيمة التطوير التنظيمي) لكل بئر على الفور باستخدام القارئ الصغري المحدد على 450 نانومتر خلال 10 دقائق بعد إضافة حل التوقف.

أ ummary

1. إعداد جميع الكواشف والعينات والمعايير.

2. إضافة عينة وكاشف ELISA في كل بئر. احتضان لمدة 1 ساعة عند 37 درجة مئوية.

3. غسل لوحة 5 مرات.

4. إضافة حل الركيزة A و B. احتضان لمدة 10 دقيقة عند 37 درجة مئوية.

5. إضافة حل توقف واللون يتطور.

6. اقرأ قيمة التطوير التنظيمي في غضون 10 دقائق.

ج كاء النتيجة

قم ببناء منحنى قياسي عن طريق رسم متوسط ​​OD لكل معيار على المحور الرأسي (Y) مقابل التركيز على المحور الأفقي (X) ورسم منحنى مناسب من خلال النقاط على الرسم البياني. يمكن إجراء هذه العمليات الحسابية على أفضل وجه باستخدام برنامج منحني قائم على الكمبيوتر ويمكن تحديد أفضل خط من خلال تحليل الانحدار.

Referances