جرذ Fetuin ألف إليسا نوع عدة سندويتش مع شهر واحد الجرف الحياة

حساسية عالية من الجرذان Fetuin A ELISA كيت عالية الدقة FETU-A ساندويتش ELISA كيت

Cat.No E 0580Ra

نطاق منحنى قياسي : 0.5ng / ml - 200ng / ml

حساسية : 0.26ng / ml

الحجم : 96 بئرا

التخزين : تخزين الكواشف في 2-8 درجة مئوية. لأكثر من 6 أشهر تخزين الرجوع إلى تاريخ انتهاء الصلاحية يبقيه عند -20 درجة مئوية. تجنب تكرار دورات ذوبان الجليد. إذا تم فتح الكواشف الفردية فمن المستحسن أن يتم استخدام هذه المجموعة في غضون شهر واحد.

P ريسيجين

الدقة داخل الفحص (الدقة داخل اختبار) تم اختبار ثلاث عينات من التركيز المعروف على لوحة واحدة لتقييم الدقة داخل الفحص.

Inter-Assay Precision (الدقة بين المقايسات) ثلاث عينات من التركيز المعروف كانت

اختبار في فحوصات منفصلة لتقييم الدقة بين الاختبار.

CV (٪) = SD / mean x 100

Intra-Assay: CV <8٪

بين المقايسة: السيرة الذاتية <10 ٪

أنا عشت يو سي

هذه المجموعة الساندويتش هي للكشف الكمي الدقيق للجرذان Fetuin A (المعروف أيضا باسم FETU-A) في مصل الدم ، والبلازما ، وزرع الخلايا الخلوية ، lysates الخلية ، homogenates الأنسجة.

احتياطات P

• قبل الاستخدام ، يجب تدفئة الطقم والعينة بشكل طبيعي إلى درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة.
• يجب اتباع هذه التعليمات بدقة في التجربة.
• بمجرد إزالة العدد المطلوب من الشرائط ، قم بإعادة ختم الكيس على الفور لحماية المتبقي من التدهور. تغطية جميع الكواشف عندما لا تكون قيد الاستعمال.
• تأكد من ترتيب pipetting ومعدل إضافة من جيدا إلى عندما الكواشف pipetting.
• يجب أن تكون نصائح الماصة ولحام السدادة في اليد نظيفة ويمكن التخلص منها لتجنب التلوث المتبادل.
• تجنب استخدام الكواشف من مجموعات مختلفة معا.
• حل Substate B حساس للضوء ، لا تعرض محلول الطبقة السفلية B للضوء لفترة طويلة.
• وقف الحل يحتوي على حمض. يرجى ارتداء حماية العين واليد والبشرة عند استخدام هذه المواد. تجنب ملامسة الجلد أو الأغشية المخاطية بعدة كاشف.
• لا ينبغي استخدام الطقم بعد تاريخ انتهاء الصلاحية.

جمع العينات

مصل المصل يسمح بالتجلط لمدة 10-20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. الطرد المركزي في 2000-3000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة.

البلازما جمع البلازما باستخدام EDTA أو الهيبارين كمضاد للتخثر. عينات الطرد المركزي لمدة 15 دقيقة في 2000-3000 دورة في الدقيقة في 2 - 8 درجة مئوية في غضون 30 دقيقة من جمع.

البول جمع بواسطة أنبوب معقمة. الطرد المركزي في 2000-3000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة تقريبا. عند جمع السائل pleuroperitoneal والسائل الدماغي الشوكي ، يرجى اتباع الإجراءات المذكورة أعلاه.

الخلية C ulture S upernatant تجمع بواسطة أنابيب معقمة عند فحص مكونات سرية. الطرد المركزي في 2000-3000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة تقريبا. جمع supernatants بعناية. عند فحص المكونات داخل الخلية ، استخدم PBS (الرقم الهيدروجيني 7.2-7.4) لتخفيف تعليق الخلية لتركيز الخلية ما يقرب من 1 مليون / مل. تلف الخلايا من خلال دورات التجميد والذوبان المتكررة للسماح للمكونات الداخلية. الطرد المركزي في 2000-3000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة تقريبا.

الأنسجة شطف الأنسجة في PBS (الرقم الهيدروجيني 7.4) لإزالة الدم الزائد بدقة ويزن قبل التجانس. أنسجة اللحم المفروم وتجانسها في PBS (pH7.4) مع الخالط الزجاج على الجليد. ذوبان الجليد في 2-8 درجة مئوية أو تجميد عند -20 درجة مئوية. الطرد المركزي في 2000-3000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة تقريبا.

ملحوظة

• يجب التنبؤ بتركيزات العينة قبل استخدامها في الفحص. إذا لم يكن تركيز العينة ضمن نطاق المنحنى القياسي ، يجب على المستخدمين الاتصال بنا لتحديد العينة المثلى لتجاربهم الخاصة.
• يجب تخزين العينات المراد استخدامها خلال 5 أيام بدرجة حرارة 2-8 درجة مئوية. يجب أن تكون عينات aliquoted أو يجب أن يتم تخزينها في -20 درجة مئوية في غضون شهر واحد أو -80 درجة مئوية في غضون 6 أشهر. تجنب تكرار دورات التجمد.
• يجب إحضار العينات إلى درجة حرارة الغرفة قبل بدء الاختبار.
• الطرد المركزي لجمع عينة قبل الاستخدام.
• لا يمكن اختبار عينات تحتوي على NaN3 لأنه يمنع نشاط الحصان Radish Peroxidase (HRP).
• جمع supernatants بعناية. عندما تحدث الترسبات أثناء التخزين ، ينبغي إجراء الطرد المركزي مرة أخرى.
• يمكن أن يؤثر انحلال الدم بشكل كبير على صحة نتائج الاختبار. الحرص على تقليل انحلال الدم.

* لا يمكن تخفيف S وافرة مع هذه المجموعة. بسبب المادة التي نستخدمها لإعداد الطقم ، قد يؤدي تداخل عينة المادة إلى زيف خصوصية ودقة الفحص.

R eagent P التعويض

يجب إحضار جميع الكواشف إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.

معيار إعادة تشكيل 120μl من المعيار (240ng / ml) مع 120μl من المخفف القياسي لتوليد حل الأسهم القياسية 120ng / ml. دع المعيار يجلس لمدة 15 دقيقة مع التحريك اللطيف قبل إجراء التخفيفات. قم بإعداد النقاط القياسية المكررة من خلال تمييع محلول المخزون القياسي (120ng / ml) 1: 2 مع مخفف قياسي لإنتاج حلول 60ng / ml و 30ng / ml و 15ng / ml و 7.5ng / ml. يخدم المخفف القياسي كمعيار صفر (0 نانوغرام / مل). يجب تجميد أي محلول متبقي بدرجة حرارة -20 درجة مئوية واستخدامه خلال شهر واحد. تخفيف من الحلول القياسية المقترحة على النحو التالي:

Wash Buffer Dilute 20ml من Wash Wash Buffer Concentrate 30x في الماء منزوع الأيونات أو المقطر للحصول على 500 مل من 1x Wash Wash. إذا تشكلت البلورات في المركز ، فاخلطها بلطف حتى تذوب البلورات تمامًا.

أ ummary

1. إعداد جميع الكواشف والعينات والمعايير.

2. إضافة عينة وكاشف ELISA في كل بئر. احتضان لمدة 1 ساعة عند 37 درجة مئوية.

3. غسل لوحة 5 مرات.

4. إضافة حل الركيزة A و B. احتضان لمدة 10 دقيقة عند 37 درجة مئوية.

5. إضافة حل توقف واللون يتطور.

6. اقرأ قيمة التطوير التنظيمي في غضون 10 دقائق.

ج كاء النتيجة

قم ببناء منحنى قياسي عن طريق رسم متوسط ​​OD لكل معيار على المحور الرأسي (Y) مقابل التركيز على المحور الأفقي (X) ورسم منحنى مناسب من خلال النقاط على الرسم البياني. يمكن إجراء هذه العمليات الحسابية على أفضل وجه باستخدام برنامج منحني قائم على الكمبيوتر ويمكن تحديد أفضل خط من خلال تحليل الانحدار.